Az embrió megválasztása

Embrionális kultúra

órával megtermékenyítés
Az embriókat apró cseppekben (20 ml) tenyésztjük kulturális központ alján elhelyezett Petri-csésze és olajjal borítva megakadályozzák a párolgást, korlátozzák a gázcserét és védik a szennyeződéseket. A dobozokat a inkubátor amelynek hőmérséklete 37 ° C-ra van beállítva, és amelynek levegője CO2-ban dúsul (5%). Hogy ne zavarja őket, az embriók megfigyelése mikroszkóp alatt a szigorú minimumra korlátozódik. Ha az embriókat áthelyezni vagy környezetet kell megváltoztatni, akkor azokat a nagyon finom üveg pipetta (az embrió nagysága körülbelül milliméter tizede) alatt a binokuláris nagyító felszerelve a főzőlap, steril környezetben.

Végén a 48 órás inkubálás a megtermékenyített petesejt megjelenése már egészen más. Több sejtből áll, és a zona pellucida nevű boríték.

Ez már egy embrió, amely átvihető az anyaméhbe. Az endometrium (a méh belső bélése) felkészült egy lehetséges embrióra.

A megtermékenyítés végén, a petesejt 2 sejtre oszlik, majd 4-re, majd 8-ra stb. Körülbelül 200 sejt lesz egy hét múlva. Ezek a sejtosztódások ezután folytatódnak, több ezer sejtet biztosítva, amelyek egyesülve alkotják a jövőbeni szervek körvonalát.

Mindezeket a stádiumokat az 1. naptól (2 sejt) a 2. hónapig embriónak nevezzük. Ezt követően magzatról beszélünk, amelyben az előző körvonalak fokozatosan végső szervekké alakulnak (sejtek milliárdjai).

StatusWhenRepresentationPhoto
Zigóta (megtermékenyített petesejt)24 órával a megtermékenyítés után
2 sejt30 órával a megtermékenyítés után
4 sejt40 órával a megtermékenyítés után
8 sejtMegtermékenyítés után 60 órával
Morula96 órával a megtermékenyítés után
BlastocystaMegtermékenyítés után 5 nappal

A gyakorlatban az IVF-ben ezek a legelső embrionális stádiumok, amelyeket megfigyelünk: 2 nappal a ivarsejtek jelenléte után ezek átlagosan 4 sejtes szakaszok.

De a kultúra legfeljebb 7 napig meghosszabbítható a blasztociszta stádiumig.

2 nap elteltével a kísérletek 20% -ában nincs embrió.

7 nap elteltével, a kísérletek 35-40% -ában nincs blasztociszta.

Az embrionális életképtelenség okai:

• kromoszóma-rendellenességek jelenléte,

• az őket biztosító petesejtek érettsége,

• talán a sperma minősége.

A D2 embriók osztályozási rendszere

Nagyon tökéletlenül, 2 napos tenyésztés után, morfológiai megjelenésükre való tekintettel, éretlen petesejtekből származó embriók azonosíthatók. Ebben a szakaszban meglehetősen változó és leírhatjuk a sejtek károsodása nélkül: a sejtek száma, mérete, alakja, megjelenése, a burkok, a zona pellucida és a gomolyfelhő megjelenése, széttöredezése stb.

A D2-n lévő embrió morfológiája több mint 25 éve a leggyakrabban használt paraméter.

Meg tudtunk határozni egy „ideális” embriót és különféle variánsokat, amelyek többé-kevésbé távol állnak tőle; és nagyjából osztályozhatjuk őket aszerint pontszámok:

Az Eylau La Muette laboratóriumban használt pontszám

1. számjegy: a cellák száma

48 órakor az embriónak általában 4 sejtje van, másoknak 2,3 vagy 5 lesz.

A minősítés a cellák száma: 4 sejt 48 órán belül, 8 sejt 72 órán belül ...

2. ábra: sejt-szabályosság

Például egy 4 sejtes embrió sejtjeinek (blasztomerjeinek) kell lenniük azonos méretű.

A minősítés az 1 tipikus embrió és 2 nem tipikus embrió eseténe. A T betűt a Typical és az A betűt az Atypical esetében is használják.

3. számjegy: a töredezettség mértéke

A sejtosztódás során fragmentumok (kis sejtdarabok) alakulhatnak ki. Ha az embrió több mint 50% -ban fragmentálódik, akkor csökken a fejlődés és az implantáció esélye.

1: A töredezettség mértéke kevesebb mint 10%

2: töredezettség 10% és 50% között

3: töredezettség 50% és 80% között

4: töredezettség nagyobb mint 80%

Így egy embriókiváló minőségű, szabályos cellás és töredezett lesz a 411-es osztályzat, másrészt rossz minőségű, 4 szabálytalan és töredezett sejtet tartalmazó embriót jegyeznek fel 423 vagy 424.

Az IMR-nél alkalmazott 4 pontos embrionális pontszám

Megfigyelés Pontok száma Összpontszám: 1,2,3 vagy 4 pont
Osztott embriók
Igen1 pont
Nem0 pont
A sejtosztódás szakasza
4 sejt1 pont
Egyéb szakaszok0 pont
Szabálytalan sejtek (méret vagy forma)
Hiány1 pont
Jelenlét0 pont
Töredezettség (20% vagy annál nagyobb)
Hiány1 pont
Jelenlét0 pont