OAB vércsoport - Synevo

Informţii. általános

Emberben 26 vércsoport-rendszert azonosítottak 228 antigénnel; a vércsoport-rendszer egy vagy több antigénből áll, amelyeket egyetlen gén irányít, vagy két vagy több szorosan kapcsolódó gén komplexe. Más antigéneket is azonosítottak, amelyek nem voltak hozzárendelve kialakult rendszerekhez. Az eritrocita antigének lehetnek fehérjék, glikoproteinek vagy glikolipidek. A legtöbbet az eritrocita szintetizálja, azonban néhány antigén, például a Lewis-rendszerhez tartozó, adszorbeálódik az eritrocita membránján lévő plazmából. Egyes antigének specifikusak az eritrocitákra, míg mások a test más sejtjein találhatók. A vércsoportok ismerete elengedhetetlen a transzfúziós terápia szempontjából. Így azok a személyek, akik nem rendelkeznek bizonyos vörösvértest-antigénekkel, alloantitesteket termelhetnek, ha vértranszfúzió során vagy terhesség alatt az antigéneket tartalmazó vérnek vannak kitéve. Az eritrocita antigénekkel kölcsönhatásba lépő antitestek azonnali vagy késleltetett hemolitikus transzfúziós reakciókat és újszülöttek hemolitikus betegségét idézik elő 4 .

Az ABO vércsoportrendszer a legfontosabb vércsoportrendszer, mert: ha az antigének nem expresszálódnak az eritrociták felületén, a megfelelő antitestek mindig jelen vannak a plazmában, az antitesttermelés ingereit különféle környezeti tényezők képviselik, mint pl. baktériumok (pl. E. coli), amelyek a felszínen az ABO szénhidrátokkal szinte azonos szerkezetekkel expresszálódnak; a képződött antitestek túlnyomórészt IgM és IgG keveréke, amelyek 37 ° C-on aktívak és képesek aktiválni a komplementet, és az eritrocita membránon található antigén helyek nagy sűrűsége lehetővé teszi számos antitest megkötését, ami inkompatibilis vérátömlesztés esetén az ABO rendszerben, akut hemolitikus transzfúziós reakciókban 2; 4 .

Valamennyi immunokompetens egyén természetes antitesteket (izoagglutinineket vagy izohemolizineket) termel a hiányzó ABO (H) csoport antigénjeivel szemben. Az anti-A és az anti-B általában 3-6 hónappal a születés után detektálható, és 5 éves korában az antitest-titer eléri a maximumát, és felnőttkorban is fennmarad. Az IgM antitestek titerje fokozatosan csökkenhet előrehaladott korral. Anti-A és anti-B antitestek is vannak jelen azokban, akiknek gyenge A vagy B variánsuk van. Az újszülöttek általában nem tartalmaznak jelentős mennyiségű anti-A és anti-B-t a plazmában, kivéve azokat, akik alloimmunizált anyáktól születtek, akiknél az anyától a placentán átjutott IgG antitestek jelen lehetnek. Az ABO antitestek nem jelentik az újszülött hemolitikus betegségének fő okát, mivel az antitestek gátolják a vérben lévő oldható A és/vagy B anyagokat, valamint a vörösvértesteken kívül más sejteken lévő A vagy B antigéneket; az antitestek kötődési affinitása a cukormolekulákhoz is gyengébb, mint a fehérjemolekulák, például a D4 antigén ellenanyagoké. A hemolízis akkor valószínűbb, ha az anya O csoportba tartozik, az A 2 gyermek csoportba tartozik .

Ajánlások az ABO vércsoport meghatározására 2

transzfúzió előtt;
invazív vagy műtéti beavatkozás előtt, amely potenciálisan vérzési szövődményekkel járhat, amelyek transzfúziót igényelhetnek;
anya és gyermek antepartum és posztnatális immunhematológiai monitorozása;
véradóknak;
az ABO csoport kompatibilitására a vese és a szív transzplantációjában.

Betegképzés - nem szükséges előzetes képzés; Hasznos információk a meghatározás előtt végrehajtott makromolekuláris oldatok infúziós kezeléséről, az elmúlt 120 nap transzfúzióiról, Gram-negatív csírákkal fertőző betegségekről szepszisben vagy anélkül, rosszindulatú betegségekről (carcinoma, lymphoma, myeloma) 3 .

Begyűjtött minta - a) kapilláris vér az ujj pépéből; b) vénás vér 3 .

Betakarítási konténer - b) adalékanyagok vagy aktiváló gél nélküli vákuumozó (vörös vagy színtelen kupak); automatikus módszerhez: 4 ml EDTA-t tartalmazó vakutainer (sötétlila fedél) 3 .

Betakarított mennyiség - b) amennyire a vákuum megengedi 3 .

A bizonyíték elutasításának okai - erősen hemolizált minta 3 .

A minta stabilitása - a vizsgálatot azonnal elvégzik, ha ez nem lehetséges, a mintát 48 órán át 2-8 ° C-on tartják; az automatikus módszer esetében a vérminta stabilitása 7 nap 2-8 ° C-on 3 .

Betakarítás után szükséges feldolgozás - szobahőmérsékleten történő teljes koaguláció után a szérumot és az alvadékot eltávolítjuk. A fennmaradó vörösvértestekből 10% -os szuszpenziót készítenek saját plazmájában vagy sóoldatban 1; 3. A kártyaagglutináció módszeréhez 5% vörösvértest szuszpenziót készítenek egy speciális szuszpenziós közegben. Az automatikus módszerhez a vérmintát centrifugálják, hogy plazmát kapjanak, és behelyezik az analizátorba (a plazma a vörösvértestek felett marad) 3 .

A meghatározás módszerei - A Synevo laboratóriumok elvégzik:

a. Közvetlen/globuláris módszer (Beth-Vincent) az ABO vércsoport meghatározására anti-A, anti-B és anti-AB szérumok alkalmazásával, a következő változatokkal:

- hemagglutináció a tányéron 3. Két kontrollt használnak: AB kontroll (a beteg vörösvérsejtjei AB szérummal) és auto-kontroll (vörösvértestek és saját szérum) 1 .

- agglutináció és gélszűrés kártyákon meghatározandó eritrocita antigén-specifikus reagenssel (egér vagy humán monoklonális antitestek) impregnált gélt tartalmazó mikrocsövekkel - közvetlen ABO-csoport vizsgálata és Ag RH1 (D) és Ag RH 1,2,3 (DCE) meghatározása.

A kártya agglutinációs módszer esetében a pozitív reakció csak akkor érvényesül, ha a kontroll mikrotubus negatív. A pozitív reakciót az agglutinátok + -tól -ig terjedő méretétől függően becsüljük meg ++++.

A minták minden egyes futtatásakor ismert csoportot és Rh kontroll vért használunk .

b) a hemagglutináció automatikus módja kútlemezeken (a Synevo Központi Laboratóriumban)

A munkalapok (S Erytype) 12 tesztcsíkot tartalmaznak, mindegyik 8 üreggel (1 csík = teljes ABO teszt és Rh faktor).

A vércsoportot meghatározzuk mind a közvetlen, gömbös módszerrel (Beth - Vincent), amely vizsgálati szérumokat használva kiemeli az eritrocita antigéneket (száraz monoklonális szérumok, amelyek a reakciókutak részét képezik), mind az indirekt plazma módszerrel (Simonin Vincent). ), amely kiemeli a teszt eritrociták segítségével elemzett plazmában lévő antitesteket, az agglutináció a munkacsík béleletlen üregében történik. A csík mélyedése negatív reakciókontrollt tartalmaz.

A közvetlen módszerrel az eritrocita agglutinációs reakciót bromelain (proteolitikus enzim, amely lehasítja a polipeptidláncokat a vörösvérsejtek felületén, ezáltal csökkentve a sejtek negatív terhelését; ezáltal a megfelelő antitest jelenlétében növeli a vörösvérsejtek vonzerejét) alkalmazása növeli a bromelain használatát.

Az utolsó szakaszban a munkacsík minden egyes lyukát az elemző automatikusan kiértékeli és lefényképezi, az eredményeket a következőképpen értelmezi:

Pozitív reakció - agglutináció (az intenzitás becslése 1+ - 4+)
Negatív reakció - nincs agglutináció
Meggyőző reakció - a +/- reakciót az orvos értelmezi

Az összes képet és eredményt az orvos ellenőrzi és érvényesíti 3 .

Határértékek és interferencia

A vércsoport meghatározásának eredményét két embernek kell elolvasnia, és végül meg kell erősíteni egy második vérmintán 1; .

Olvasási hibák technikai hibák miatt:

- piszkos üvegáru; bakteriális szennyeződés;

- mikrotagok jelenléte (hamis agglutináció);

- nem figyelték meg: vörösvértest/szérum arányok, a vérvizsgálatok csepegésének sorrendje (ellentmondásos agglutináció), olvasási idő - késői olvasás: száraz élek (hamis agglutináció), korai olvasás (agglutináció hiánya vagy rossz agglutináció).

A vörösvérsejtek által okozott hibák

a) Tekercsek jelenléte (pszeudoagglutináció): makromolekuláris oldatok (Dextran, HES) használata, koagulációs rendellenességek, nem teljesen koagulált vérminták, hiperfibrinogenémia, fibrin lebomlástermékek, fibrinolitikus szerek, dysproteinemia, paraproteinemia, cresogulin, gyógyszerek (nagy dózisú heparin, protamin-szulfát), reumás faktorok, megnövekedett koleszterinszint, bilirubin, leukocitózis, leukocita enzimek 2. Az AB kontroll pozitív; Az eritrociták felszámolása lehetővé teszi az 1 gömbminta helyes elvégzését .

Hideg agglutininek jelenléte (az autó fénye pozitív). A vérmintát és a reagenseket 37 ° C-on előinkubáljuk, és a vizsgálatot forrón végezzük 2 .
Az alloantitestek által borított vörösvérsejtek: inkompatibilis terhességből származó újszülöttek (Rh, ABO rendszerben), inkompatibilis vérrel transzfundált betegek.
A vércsoport meghatározása a köldökzsinórból gyűjtött véren: A wharton-zselatin, az eritrocitákat körülvevő makromolekuláris anyag, pszeudoagglutinátok megjelenését kelti. Eltávolításához az eritrocitákat legalább 6-szor meg kell mosni, mielőtt meghatározzuk az 1-et .
A gyógyszer immun komplexeinek jelenléte.

Gram-negatív bacillusokkal járó szeptikémiákban a kriptoantigének (T) a legtöbb emberi szérumban jelen lévő antitestek (anti-T) által felismert bakteriális ágensek enzimatikus hatásának vannak kitéve. Az AB kontroll pozitív 1 .

Hiányos vagy gyenge agglutinációk vagy kettős populációs megjelenés: az agglutináció nem teljes, szabad vörösvérsejtek jelenlétével (az agglutinátok rózsaszín háttéren jelennek meg) 1; 2:

régi vér;
gyenge antigének: újszülöttek, koraszülöttek;
gyenge A vagy B alcsoport;
antigéncsillapítás (leukémiákban, limfómákban, Hodgkin-kórban);
O csoport vérével transzfundált A vagy B csoportos beteg, anyai-magzati vérzés;
nagy mennyiségű A vagy B anyag jelenléte a plazmában (gyomorrák, hasnyálmirigy), amely semlegesíti a tesztantitesteket (a vörösvérsejteket le kell mosni, hogy eltávolítsák őket);
kiméra vagy mozaik jelenléte (kivételes, pl. csontvelő utáni transzplantáció).