Összehasonlító vizsgálatok a dermális penetrációról és a permúcióról a diffúziós sejtekben - PDF
A Hannoveri Állatorvostudományi Egyetem Farmakológiai, Toxikológiai és Gyógyszerészeti Intézetéből, Összehasonlító vizsgálatok a dermális penetrációról és a penetrációról a diffúziós sejtekben INAUGURALI ÉRTEKEZÉS Az állatorvosi doktor fokozatának megszerzéséhez (Dr. med. Vet.) A Hannoveri Állatorvostudományi Egyetem (született Franzbach) a Gronau Hannover 23-ból
Tudományos szupervízió: Univ.-Prof. Dr. Kietzmann M. 1. bíráló: Univ.-Prof. Dr. M. Kietzmann 2. bíráló: Univ.-Prof. Dr. H.C. Rák szóbeli vizsgálat napja: május 27, 23
Hálával szenteltem a szüleimnek és a családomnak
1 BEVEZETÉS 1 2 IRODALOM ÁTTEKINTÉS 2 2.1 A bőr felépítése és működése 2 2.1.1 Epidermis 2 2.1.2 Dermis 5 2.1.3 Hypodermis 7 2.1.4 Függelékek 7 2.1.5 A bőr érrendszere 8 2.2 Transdermális behatolás, behatolás és felszívódás 9 2.2. 1 A bőr akadályozó funkciója 9 2.2.2 A bőrbe való behatolás és a lokálisan alkalmazott anyagok farmakokinetikája 12 2.2.3 A behatolás befolyásolása 19 2.3 A transzkután behatolás és a penetráció vizsgálatának modelljei 22 2.3.1 In vivo modellek 22 2.3.2 In vitro modellek 23 2.3.2.1 Diffúziós sejtek 23 2.3.2.2 Saarbrücken behatolási modell 26 2.3.2.3 Sejtkultúrák és mesterséges bőr 29 2.3.2.4 Perfúziós modellek 3 2.4 Benzoesav, tesztoszteron és hidrokortizon mint transzdermális behatolás és behatolás vizsgálati anyagai 32 3 ANYAG ÉS MÓDSZEREK 35 3.1 Vizsgálati anyag 35 3.2 Felhasznált tesztanyagok 37 3.2.1 Benzoesav 37 3.2.2 Hidrokortizon 37 3.2.3 Tesztoszteron 38 3.3 Diffúziós sejtek 38
3.4 A kísérlet elvégzése 39 3.5 A vizsgált anyagok kimutatása 4 3.5.1 Enzim immunoassay 4 3.5.2 Benzoesav meghatározása nagynyomású folyadékkromatográfiával (HPLC) 41 3.6 Statisztikai értékelés 43 4 EREDMÉNYEK 44 4.1 Benzoesav behatolás és áthatolás 44 4.1.1 Patkánybőr 44 4.1.2 Kutya bőre 45 4.1.3 Ló bőre 46 4.1.4 Sertés bőre 46 4.1.5 Tehénbőr 49 4.2 Hidrokortizon behatolása és behatolása 51 4.2.1 Patkány bőre 51 4.2.2 Kutya bőre 52 4.2.3 Ló bőre 53 4.2.4 Sertés bőre 54 4.2.5 Tehén bőre 55 4.3 Tesztoszteron behatolása és áthatolás 57 4.3.1 Patkánybőr 57 4.3.2 Kutya bőr 58 4.3.3 Ló bőr 59 4.3.4 Sertés bőr 6 4.3.5 Szarvasmarha bőr 61 5 MEGBESZÉLÉS 63 5.1 Az állatfajon belüli bőr helyeinek összehasonlítása 63 5.1.1 Benzoesav áteresztés 63 5.1.2 Hidrokortizon permeabilitás 64
5.1.3 Tesztoszteron permeáció 65 5.2 Állatfajok összehasonlítása a testrégiók alapján 66 5.2.1 Benzoesav áteresztés 66 5.2.2 Hidrokortizon permeáció 69 5.2.3 Tesztoszteron permeabilitás 7 5.3 A tesztanyagok benzoesav, tesztoszteron és hidrokortizon összehasonlítása 73 5.4 Következtetés 76 6 ÖSSZEFOGLALÓ 79 7 9 FÜGGELÉKTÁBLÁZATOK 99
A rövidítések felsorolása A. Arteria ábra. Ábra cm centiméter cm² négyzetcentiméter ELISA enzimmel kapcsolt immunszorbens vizsgálat g gramm C Celsius fok h óra HPLC nagy teljesítményű folyadékkromatográfia i.v. intravénás l liter ln logaritmus m férfi mg milligramm perc perc ml milliliter mm milliméter µg mikrogramm µl mikroliter µm mikrométer n kísérletek száma ng nanogramm lásd az V. oldaltáblázatot.
32 (BRONAUGH et al. 1982b) Kutya 12-45 (SCHWARZ és MEYER 1994) 1-45 (CREED 1958) Ló 25-45 (MEYER 22) 3-9 (TALUKDAR et al. 1972) Sertés 34-47 (m ) (MEYER 1986) 41-57 (w) 7-14 (MEYER és NEURAND 1975) szarvasmarha
32 (MEYER 21) 4-6 (GOLDSBERRY és CALHOUN 1958) Rindereuter 5-8 (SEEGERS 23) 6-2 (LUDEWIG et al. 1996) 1. táblázat: A szőrös bőr epidermisz vastagsága különböző fajokban (adatok µm-ben)
3 A következő ábrákon (1-6. Ábra) az ebben a munkában vizsgált állatfajok epidermiszét (hasi bőrt) mutatjuk be szövettanilag. 1 2 3 4 5 6 5 µm 1-6. Ábra: Patkány (1), kutya (2), ló (3), sertés (4), szarvasmarha (5) és tőgybőr (6) epidermise (hasi bőre)