Tumor nekrózis faktor TNF-alfa - Synevo
Tájékozottii. általános és ajánlások a TNF meghatározására-α
A TNF (tumor nekrózis faktor) egy gyulladáscsökkentő citokin, amelynek neve abból áll, hogy képes elpusztítani a daganatsejteket és vérzéses nekrózist indukálni egér transzplantált daganatokban. .
A TNF-α-t (casectin) és a TNF-β-t (limfotoxin) kezdetben makrofágok és limfociták által termelt citotoxikus tényezőként írták le; Ezt követően azt találták, hogy a TNF-a és a TNF-β két olyan fehérje, amelyek homológiát mutatnak a 3; 5 aminosavszekvenciák 34% -ával. Mindkét mediátor ugyanazon receptorokon keresztül hat a célsejtekre, ezért hasonló, de nem azonos biológiai hatásuk van.
A TNF-α gén a 6. kromoszómán helyezkedik el. Denaturációs körülmények között a TNF-α egy nem glikozilezett 17 kDa fehérje. A TNF-a biológiailag aktív formája a trimer. Ezen oldható formán kívül van egy membránhoz kötött forma (28 kDa), amely a TNF-α-termelő sejtek felszínén helyezkedik el, és amely az oldható forma pooljaként szolgál, amelyet a proteolitikus hasítás hoz létre. .
A TNF-α-t nemcsak makrofágok és monociták, hanem limfociták, hízósejtek, neutrofilek, keratinociták, asztrociták, mikroglia, simaizomsejtek és néhány tumorsejtvonal is termeli 5. Nagy mennyiségű TNF szabadul fel a makrofágok, a CD4 + T limfociták és a természetes gyilkos (NK) sejtek lipopoliszacharidokkal, baktériumtermékekkel és interleukinnal való érintkezésekor 1 3 .
A TNF-α közvetlenül két különálló felületi receptoron keresztül hat, úgynevezett TNFR I és TNFR II, különböző molekulatömegű 3; 4; 5. Ezek a receptorok az eritrociták kivételével minden sejttípuson azonosíthatók. Ezeknek a receptoroknak a részeit proteázok hasítják, és eljutnak az extracelluláris közegbe, oldódó receptorokat képezve; a TNF-α endogén inhibitoraként hatnak, és így szabályozzák az extracelluláris TNF-α 4 szintjét .
A TNF-a receptorhoz való kötődése konformációs változásokat eredményez a receptor struktúrájában, ami a sejtproliferációban, a gyulladásos válaszban és a sejtek apoptózisában szerepet játszó más fehérjék transzkripciójának kaszkád aktiválásához vezet. A TNF-α helyi parakrin hatással bírhat (a TNF koncentrációjának helyi növekedése a gyulladás kardinális jeleit okozhatja: bőrpír, fájdalom, hő és duzzanat), vagy távolról is működhet, mint az endokrin hormonok 5. Receptorainak a legtöbb szövetben való jelenléte miatt a TNF-α sokféle biológiai hatást fejt ki:
- citolitikus és citosztatikus hatások a tumorsejtekre;
- kemotaktikus hatás a neutrofilekre 3;
- növeli az endoteliális sejtek permeabilitását a gyulladásos régióban; nemcsak az immunsejtek felhalmozódását okozzák, hanem hatással vannak az alvadási folyamatra is;
- az izomsejtekben és az adipocitákban különböző metabolikus folyamatokat aktivál, hogy biztosítsa a gyulladásos reakcióhoz szükséges energiát 1;
- a makrofágokban stimulálja a fagocitózist és a prosztaglandin E2 termelést;
- más szövetekben nő az inzulinrezisztencia;
- aktiválja az oszteoklasztokat, ezáltal serkenti a csontfelszívódást;
- növekedési faktor a fibroblasztok számára és stimulálja a kollagenáz szintézist;
- fokozza a T-limfociták szaporodását az interleukin 2 3 -al történő stimulálás után;
- étvágytalanságot és lázat okoz, mint endogén pirogén 1;
- felelős a rosszindulatú folyamatokkal és a legtöbb parazita fertőzéssel járó cachexia szindrómáért 5 .
A szérum TNF-α meghatározása a szepszishez, traumához és szívelégtelenséghez társuló szisztémás gyulladásos válasz (SIRS) markere. Néhány tanulmány kimutatta a cerebrospinalis folyadékban a TNF-α koncentráció összefüggését a sclerosis multiplex aktivitásának mértékével; másrészt a TNF-α meghatározása hasznos lehet a bakteriális agyhártyagyulladás és az agyhártyagyulladás egyéb okainak megkülönböztetésében 1 .
Állatkísérletek kimutatták, hogy a TNF-α részt vesz a reumás ízületi gyulladás és a gyulladásos bélbetegségek patogenezisében, az előgyulladásos hatása miatt, az endothel sejtek aktiválásával és a neutrofil kemotaxis kiváltásával. Emiatt ezen állapotok kezelése magában foglalja a TNF-α inhibitorokat is: vagy anti-TNF-α monoklonális antitesteket (infliximab, adalimubab), vagy antitest-receptor fúziós fehérjéket, illetve TNFRII-IgG1 (etanercept) 5 .
A TNF-α szintek alkalmazhatók az immunrendellenességek diagnosztizálásában és a kezelések nyomon követésében, csak a kiegészítő klinikai és paraklinikai adatokkal korrelálva 2 .
Betegképzés - éhgyomorra (éhgyomorra) vagy étkezés után 2 .
Begyűjtött minta - vénás vér 2 .
Betakarítási konténer - vakutainer antikoaguláns nélkül, szétválasztó géllel/anélkül 2 .
Betakarított mennyiség - legalább 0,5 ml ser 2 .
A bizonyíték elutasításának okai - intenzíven hemolizált, sárgított, lipémiás vagy baktériummal szennyezett minta; a laboratóriumba nem érkezett minták fagyasztva 2 .
Betakarítás után szükséges feldolgozás - a szérumot a túró teljes képződése után a lehető leghamarabb centrifugálással elválasztjuk, és a mintát azonnal -20 ° C-on lefagyasztjuk; a laboratóriumi pontokon kívül gyűjtött mintákat a fagyasztott mintákra szánt edénybe 2 szállítják .
A minta stabilitása - a szérum -20 ° C-on 1 hónapig stabil; ne olvassa le/ne fagyassza újra 2 .
Módszer - kemilumineszcencia detektálás (CLIA) immunokémiai módszer 2 .
Referenciaértékek 1 - 2 .
Az eredmények értelmezése
A megnövekedett TNF-α szinteket szepszis, trauma, autoimmun és krónikus gyulladásos betegségek (rheumatoid arthritis, spondylitis ankylopoetica, Crohn-kór, pikkelysömör), fertőző betegségek és graft kilökődés esetén rögzítik 2 .