Autoradiográfia - biológia
Milyen meleg túl meleg az élethez az óceán feneke mélyén?
Antibiotikumok baktériumoktól
Sejtvándorlás: egy ismert fehérje újonnan felfedezett funkciója
Molekuláris iránytű a sejtek igazításához
Mi teszi a levelek öregedését ősszel
A keselyű gyöngytyúk demokráciája
Ekembo környezete: Az emberek nyílt tájakon is éltek
| Genetika | Mezőgazdaság, erdészet és állattenyésztés
A búzafajtát vad füvek keresztezésével hozták létre
Milyen meleg túl meleg az élethez az óceán feneke mélyén?
Autoradiográfia
| Ez a cikk vagy az azt követő szakasz nem rendelkezik megfelelően az igazoló dokumentumokkal (pl. Egyedi bizonyítékokkal). A szóban forgó adatokat ezért valószínűleg hamarosan eltávolítják. Kérjük, segítse a Wikipédiát az információk kutatásával és jó bizonyítékokkal. További részletek a beszélgetési oldalon vagy a verzióelőzményekben találhatók. Végül kérjük, távolítsa el ezt a figyelmeztető jelet. |
Autoradiográfia vagy Radiográfia (gyakori rövidítés: AURA) egy kémiai komponens radioaktív izotópokkal történő megjelenítését írja le, eredetileg egy fényképészeti film feketével, ma már egyre inkább egy sugárzási detektor segítségével. A kapott felvétel Autoradiogram hívott.
Alkalmazások
Három évtizedig az autoradiográfia szerves részét képezte Sanger DNS-szekvencia elemzésének. A 20. század utolsó évei óta azonban a radioaktívan jelölt DNS-nukleotidok helyett egyre inkább fluoreszcenciát használnak a szekvenciaelemzéshez.
Az autoradiográfiát rekombináns fehérjék előállításában, az enzimatikus reakciók elemzésében vagy az enzim szubsztrátok azonosításában is használják.
Farmakokinetikában alkalmazzák a felszabadulás abszorpciója eloszlásának metabolizmusának kiválasztása (LADME) vizsgálatainak elvégzésére is.
végrehajtás
Az autoradiográfia minden alkalmazásában közös, hogy radioaktív izotópokat kell csempészni az elemzendő molekulákba. A biomolekulákban a megfelelő stabil izotópok gyakori előfordulása és viszonylag alacsony veszélyességük miatt gyakran használják a 14 C (szén), 35 S (kén), 32 P (foszfor) és 3 H (trícium) radioizotópokat.
Egy expressziós plazmiddal transzformált baktériumtörzset összekeverünk egy tápközeggel, amely a radioaktívan jelölt 35S-metionint tartalmaz. 35 S-metionin beépül a rekombináns fehérjébe, amelyet a plazmid kódol. A bakteriális kivonatot SDS-PAGE választja el, a gélt megszárítják és filmet visznek fel. Miután a filmet „kitették” az izotópok által kibocsátott béta sugaraknak, a rekombináns fehérje helyzete látható a kifejlesztett filmen.
2. példa - az enzimaktivitás elemzése
Az ATPázt, az ATP nukleotidot hasító enzimet, radioaktívan jelzett 32 P-ATP-vel inkubáljuk. Az elegyet különböző időpontok után vékonyréteg-kromatográfiával választjuk el, a kromatográfiás lemezt szárítjuk és filmre helyezzük. A film 32 P-foszfáttal történő feketedése az enzim aktivitását tükrözi.