Dermatofiták azonosítása - tömegspektrometria (MALDI-TOF rendszer) Bioklinika
Áttekintés
A dermatofiták vagy dermatofita gombák fonalas mikromicettek, keratofilek, rendszertani szempontból Onygenales, Arthrodermataceae családba sorolva, és emberek és állatok potenciális kórokozói. Morfológiai szempontból kétféle konídia jelenléte jellemző: mikrokonídiumok (egyetlen sejttel) és makrokonidiumok (több sejttel, más néven páholyokkal).
Tökéletlen (aszexuális) stádiumukat, más néven anamorf formákat, három nemzetségbe sorolják - Epidermophyton, Microsporum és Trichophyton, míg a teleomorf formák néven ismert tökéletes (szexuális) stádiumok az Arthroderma nemzetségbe tartoznak.
Ökológia
Természetes körülmények között a dermatofiták képesek lebontani a keratint. Ez az anyagcsere-képesség lehetővé teszi számukra a túlélést a környezetben, és néha a felszíni betegségek kialakulását bőr, haj vagy köröm helyén - emberekben és állatokban.
Az előnyösen alkalmazott keratin típusától függően a dermatofita fajok három kategóriába sorolhatók:
- A geofilek a környezetben, különösen a talajban jelen lévő pikkelyes sejtekből, szőrszálakból és árvácska egyéb töredékeiből származó devitalizált keratint használnak. Emberekben és állatokban ritkán fordulhatnak elő betegségek; az egyének közötti átvitel szinte nulla.
- A zoofilok tropizmusa az állatok bőrében és szőrzetében lévő keratinra vonatkozik. Főleg az állatokat érinti, bár egyesek rendkívül könnyen átterjedhetnek az emberre. Az interperszonális átvitel, bár lehetséges, rendkívül alacsony.
- Az antropofilek elsősorban az emberi keratinon élősködnek. Emberekben olyan betegségeket produkálnak, amelyeket néha magas fokú fertőzés jellemez.
| M. cookei | M. canis | E. floccosum |
| M. gypseum | M. gallinae | M. audouinii |
| M. praecox | M. nanum | M. ferrugineum |
| T. ajelloi | M. persicolor | T. concentricum |
| T. terrestre | T. erinacei | T. menthagrophytes var. interdigitalis |
| T. vanbruseghemii | T. menthagrophytes var. menatgrophytes | T. rubrum |
| T. simii | T. schoenleinii | |
| T. tonsurans | ||
| T. violaceum | ||
| T. soudanense |
Epidemiológiai jellemzők
A szennyező források és az átvitel módja különösen fontos epidemiológiai jellemző az érintett fajok azonosításának folyamatában; például a vadon élő kisméretű emlősökkel vagy háziállatokkal való érintkezés okozhatja a hordozó zoofil fajok által termelt dermatofiták megfertőződését. Másrészt az interperszonális érintkezés vagy bizonyos sporttevékenységek hajlamosíthatják a túlnyomórészt antropofil dermatofita fajokkal járó fertőzések megjelenését.
A dermatofita fertőzések gyakorisága az általános populációban 10-20%.
A klinikai orvos által a laboratóriumi orvosnak szánt referenciákban megfogalmazott epidemiológiai jellegű anamnézetiák adatainak megadása nemcsak ajánlott, hanem kötelező is, biztosítva a szóban forgó dermatofita fajok pontos azonosítását.
Klinikai szempontok
- A dermatofiták könnyen megtámadják az epidermist és a furnérokat - keratinizált anatómiai struktúrákat
- A helyi gyulladásos reakció különböző intenzitású, az érintett dermatofittától és a fertőzött gazda immunállapotától függően.
- Kivételesen a szövetkárosodás mélyebb struktúrákká válhat; a dermatofita betegség (Hadida-Schousboë betegség) és a néhány dermatofita által okozott mycetoma esete.
A klinikai szempontok osztályozása - felületes dermatofiták
Epidermofiţii
- A körülmetélt epidermophytia (cirkinált "herpesz"), a tinea corporis leggyakoribb formája
- Lágyéki intertrigo (tinea cruris)
- Intertrigo interdigito-plantar (a tinea pedis leggyakoribb megnyilvánulása)
- Plantáris hiperkeratózis elváltozások ("mokaszin megjelenés")
- folliculitis
- Tokelau (fészkelt tinea)
- Egyéb epidemophyták (erythema-vezikula-eróziós-kéreg kombinációk)
Pilomicoze
- Tinea capitis (mikrosporikus és trichophytás nyírási betegségek, kerion, favus)
- Az arc tinéje (szikózis)
Onychomycosis (tinea unguium)
- Distalis subungualis onychomycosis
- Proximális subungualis onychomycosis
- Felszíni leukémia
- Teljes onychodystrophia
Micellanea
Dermatofita betegség
Dermatofita mycetoma
aratás
- a laboratóriumi orvost számos fontos szempontról tájékoztatni kell, amelyek különösen hasznosak a diagnózis felállításához: az elváltozás típusa, a beteg hivatása (ha gyanú merül fel a betegséggel kapcsolatban), minden háziállat, akivel kapcsolatba került, a beteg külföldi útjai, belépés bizonyos dermatofiták miatt endémiás területekről származó emberekkel érintkezve, gyakori uszodák, tornateremek, fitnesz klubok vagy szépségszalonok az elváltozások megjelenését megelőző időszakban.
- lehetőleg a gombaellenes szerek beadása előtt mintákat veszünk (helyi gyógyszerek esetén az utolsó beadástól számított legalább 5-7 napos időköz ajánlott)
- a betakarítási terület előzetes fertőtlenítése nem ajánlott, mivel ez befolyásolhatja a gombás elemek életképességét és a negatív növények kinyerését.
- a szőrszálakat csipesszel, lehetőleg UV fény alatt, sötét helyiségben szedjük be. Steril tartályban kerül a laboratóriumba. Maximális készenléti idő: 72 óra szobahőmérsékleten.
- a körömtöredékeket az egészséges szövet és az érintett találkozásánál szedik le, steril kürettával kaparva vagy ollóval vágva. Steril tartályban kerül a laboratóriumba. Maximális készenléti idő: 72 óra szobahőmérsékleten.
- a bőrpikkelyeket az elváltozás aktív területének (általában perifériás) steril kürettával való lekaparásával vagy préseléssel, majd steril sóoldattal előre megnedvesített steril törlőkendővel történő ismételt törléssel gyűjtik le. A körülmetélt dermatofita elváltozásai esetén pufferbegyűjtés ajánlott, és magában foglalja a minta azonnali beoltását izolációs közegre.
- a nedves elváltozásokat steril tamponokkal vesszük, amelyeket szállító közegben a laboratóriumba juttatunk.
ÓVATOS! A dermatofiták 4-6 ° C-on tárolva elpusztulnak.
Közvetlen mikroszkópos vizsgálat
Kötelező, lehetővé teszi a dermatofita fertőzés gyanújának és a klinikus tájékoztatásának gyors megerősítését, jóval a kultúra pozitívuma előtt.
Kultúra
A patogén gombák izolálását elősegíti a cikloheximidet tartalmazó szilárd táptalajon vett minták beoltása, amely olyan anyag, amely képes részben vagy teljesen gátolni a szennyező gombák kialakulását. A gombák laboratóriumi körülmények között történő izolálása kóros mintáktól, azok természetétől függetlenül, vitathatatlan szükség a fertőző folyamat megértéséhez és a gombaellenes terápia megkezdéséhez.
A dermatofita gombák azonosítása tömegspektrometriával
A dermatofita gombák azonosításának klasszikus módszerei a makroszkopikus karakterek megfigyelésén (pigmentáció, növekedési mód, a telepek textúrája), a szelektív táptalajok alkalmazásán és a makro/mikrokonídiumok mikroszkópos vizsgálatán alapulnak. Ezek a módszerek rendkívül fáradságosak.
A tömegspektrometriát alkalmazó MALDI-TOF rendszer jelenleg kiváló alternatívája a hagyományos azonosítási módszereknek.
Az eredmények értelmezése
Pozitív eredmény natív mikroszkópos vizsgálaton
- A gombás fertőzésre utaló elemek jelenléte elegendő a kezelés megkezdéséhez, de nem garantálja a pozitív tenyészetek megszerzését.
Negatív eredmény mikroszkóppal, pozitív a tenyészetben
- Alacsony dermatofita gombák mennyiségét jelzi a mintában, amelyeket az érintett terület közelében gyűjtöttek be. Gombaellenes kezelés javallott.
Negatív tenyészet, pozitív eredmény közvetlen mikroszkópiában
Ennek oka lehet az elváltozás közepén levő betakarítás, ahol a dermatofiták már nem életképesek, és a korábbi gombaellenes kezelés következménye lehet. A köröm minták 33% -a hamis negatív tenyészetet ad.
A mintákból izoláló gombák jelentősége
A legtöbb esetben a dermatofita gombák izolálásának klinikai következményei vannak. Szaprofita gombák (Scopulariopsis brevicaulis, Fusarium sp.) Dermatofitikus fertőzés vagy trauma következtében jelentkeznek.
Körömtöredékek esetén javasoljuk az ismételt betakarítást, ha a Fusarium sp., Aspergillus vagy Acremonium sp.