Etanol által kiváltott fibrotikus májmodell kidolgozása a zebrafish-ban a progenitor tanulmányozásához
Bevezetés
Annak ellenére, hogy a máj parenchymasejtjei a hepatociták 1 jelentősen regenerálódnak, a krónikus májelégtelenség hatással van erre a képességre, ami regeneráló májprogenitor sejtekhez (HPC) vezet.
A krónikus májkárosodás elsősorban az alkoholfogyasztásból, a krónikus hepatitis C vírusból (HCV) 3 és az alkoholmentes zsírmájbetegségből (NAFLD) származik. 4 Tartós májfibrózishoz vezet, amely az extracelluláris mátrix (ECM) fehérjék felhalmozódásával jár. A tartós ECM felhalmozódás az intakt máj felépítését torzítja azáltal, hogy rostos hegszövetet képez 5, ami ezt követően magas morbiditással és mortalitással járó cirrhosist eredményez. Sok kísérletet tettek a fibrotikus válasz enyhítésére elsősorban a citokinek és a profibrogén aktivált myofibroblastok 6 gátlására összpontosítva. Ez utóbbiak elsősorban a máj hegképződéséért felelős főbb nem máj parenchimasejtekből származó májstellát sejtekből (HSC) származnak 4. Ennek ellenére további vizsgálatokra várnak az endogén sejtes forrásokat, köztük a CAH-kat a hepatociták regenerálására stimuláló regeneratív terápiák, tartós fibrogén sértések jelenlétében.
Sok májfibrózis kísérleti modellt írtak le emlősöknél. A szén-tetraklorid (CCl 4) ismételt injektálását széles körben alkalmazták májfibrózis kiváltására a 7-es modell egereiben és patkányaiban. A magas zsírtartalmú (HF) étrenddel kombinálva az alkohol a profibrogén gén expresszió és a máj fibrózisának jelentős mértékű felpörgetéséhez vezet a steatosis (lipidek felhalmozódása) az alkohol akut expozíciójának eredményeként a máj érzékenyebbé válik súlyosabb májkárosodásra 9.
A zebrafish, a Danio rerio, értékes gerinces modellrendszerként jelent meg a regeneráció tanulmányozásához. Bár más alsó gerincesek, például a gőte és az axolotl figyelemre méltó regenerálódási képességgel rendelkeznek, a zebrafish előnyöket mutat más modellrendszerekkel szemben a potenciális regeneratív anyag manipulálásához szükséges genetikai manipulációs és vizualizációs stratégiák tekintetében. 10 tényező. az alkoholos májbetegség (ALD) tanulmányozása az etanol (EtOH) vízhez való egyszerű hozzáadásával. Az akut EtOH lárvának és felnőtt zebrafish-nak kitett máj steatosis 11-13. Amikor a felnőtt zebrafish hosszú ideig tartó EtOH-expozícióban részesült, kollagénlerakódást figyeltek meg a fibrózissal kapcsolatos gének felújításával. Szükség van azonban olyan modellek kidolgozására, amelyek tanulmányozzák a máj regenerálódását. Az EtOH-ra mint fibrogén stimulánsra adott válasz.
Előfizetés szükséges. Kérjük, ajánlja a JoVE-t könyvtárosának.
Jegyzőkönyv
A zebrafish-t a Nemzeti Egészségügyi Intézet kritériumainak megfelelő és a Georgia Georgia Institute of Institute Intézményi Állattenyésztési és Felhasználási Bizottság által jóváhagyott szabványos protokoll alkalmazásával növelték és tenyésztették.